作者miwy (孤獨何緣)
看板Biotech
標題Re: [求救] 共同免疫沉澱法 "IP" 的問題想請教!!
時間Fri Jun 6 03:13:37 2008
※ 引述《AronYA (我也要兩人的幸福)》之銘言：
: 當我把抗體 bis 以及 cell lyse混好反應隔天，
: 接著就是離心取得以上三者沉澱的混合物後，
: 會加入sample buffer加熱處理，
: 接著離心抽上清液做SDS PAGE分析。
: 但就在這一步驟中，
: 常常在為了吸取上清液又要避開吸到bis的過程中，
: 導致每個sample的loading量很難控制。
: 想請教有沒有更好的方式可以處理loading sample，
: 或者
: 乾脆就連同bis跟sample buffer混勻後，
: 就一起loading到gel中去跑電泳嗎?
: 感謝 ~
我們家現在loading sample都是用0.05ml的針在loading
(不是打針用的那種)
他的針頭就很小
所以不怕會有吸到bis的問題
然後它的針頭也不會傷害到人(沒那麼細...)
(而且珠珠不是很大?一般的yellow tip也吸不太起來吧?!)
我也有個問題
IP要放多久阿??
以前會放o/n
現在老師說好像是一~兩個小時就可以了??
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立█◣ 要記得阿！
＜◥█ 有個女的會邊搖邊笑
▼ █ ∵ 笑到你心裡發寒........
╯└ ((
· ◤ ＞＜ η ∵ ∵ ∵∵∵∵ miwy
┌┐█◢▃))
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囧︽
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囧 囧囧囧........100連斬達成！！
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◆ From: 123.252.18.224
1F：→ pathoman:一兩個小時就可以了. 你可以比較看看 06/06 09:13
2F：推 liuse:不一定啦 06/07 00:53
3F：推 rockisno1:小弟我是先將Bis與一抗作用2hrs, 再加入cell lysate作用 06/08 16:48
4F：→ rockisno1:作用overnight... 06/08 16:48
5F：推 rockisno1:以上都是於4oC作用...另外, 小弟實驗室所使用的Bis是 06/08 16:53
6F：→ rockisno1:GE Healthcare所出產的, 顆粒似乎較小, 用yellow tip 06/08 16:53
7F：→ rockisno1:吸取的話, 會吸取到Bis, 所以小弟我都最高速離心 06/08 16:55