作者miwy (孤独何缘)
看板Biotech
标题Re: [求救] 共同免疫沉淀法 "IP" 的问题想请教!!
时间Fri Jun 6 03:13:37 2008
※ 引述《AronYA (我也要两人的幸福)》之铭言：
: 当我把抗体 bis 以及 cell lyse混好反应隔天，
: 接着就是离心取得以上三者沉淀的混合物後，
: 会加入sample buffer加热处理，
: 接着离心抽上清液做SDS PAGE分析。
: 但就在这一步骤中，
: 常常在为了吸取上清液又要避开吸到bis的过程中，
: 导致每个sample的loading量很难控制。
: 想请教有没有更好的方式可以处理loading sample，
: 或者
: 乾脆就连同bis跟sample buffer混匀後，
: 就一起loading到gel中去跑电泳吗?
: 感谢 ~
我们家现在loading sample都是用0.05ml的针在loading
(不是打针用的那种)
他的针头就很小
所以不怕会有吸到bis的问题
然後它的针头也不会伤害到人(没那麽细...)
(而且珠珠不是很大?一般的yellow tip也吸不太起来吧?!)
我也有个问题
IP要放多久阿??
以前会放o/n
现在老师说好像是一~两个小时就可以了??
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立█◣ 要记得阿！
＜◥█ 有个女的会边摇边笑
▼ █ ∵ 笑到你心里发寒........
╯└ ((
· ◤ ＞＜ η ∵ ∵ ∵∵∵∵ miwy
┌┐█◢▃))
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囧︽
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囧 囧囧囧........100连斩达成！！
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◆ From: 123.252.18.224
1F：→ pathoman:一两个小时就可以了. 你可以比较看看 06/06 09:13
2F：推 liuse:不一定啦 06/07 00:53
3F：推 rockisno1:小弟我是先将Bis与一抗作用2hrs, 再加入cell lysate作用 06/08 16:48
4F：→ rockisno1:作用overnight... 06/08 16:48
5F：推 rockisno1:以上都是於4oC作用...另外, 小弟实验室所使用的Bis是 06/08 16:53
6F：→ rockisno1:GE Healthcare所出产的, 颗粒似乎较小, 用yellow tip 06/08 16:53
7F：→ rockisno1:吸取的话, 会吸取到Bis, 所以小弟我都最高速离心 06/08 16:55