作者marshroom (從來都沒叫過我北鼻)
看板Biotech
標題[求救]永遠成功不了的定點突變
時間Wed May 7 18:31:09 2008
各位 大家好
我第一次PO文....
是這樣的 在下 從去年暑假到現在做了不下二十次的定點突變
但是呢
連一個鬼東西都沒有給我出來
後來發現是我的template在超過95度下會不見.....
這個到底是捨麼原因呢???
嘆~~~
小的 已試過 請人代抽plasmid以及換人做做看等方式
似乎 未能找到真正失敗的原因.....
天阿
連老闆都說這種卡到陰的事情他都沒遇過
可以請各位......救救我嗎?
感激不盡
再不行 我就要去求籤了
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.22.18.84
1F：推 Locutus:請問什麼叫不見，你怎麼知道不見了，因為我也想知道我的 05/07 23:14
2F：→ Locutus:是不是不見了 05/07 23:15
3F：→ marshroom:那個 跑完PCR機器 去跑膠 一個放CONTRAL 一個用SAMPLE 05/08 10:24
4F：→ marshroom:然後 sample的band不見了 05/08 10:28
5F：→ marshroom:sample是只有template....跟二次水 跑cycle然後就都不見 05/08 10:30
6F：推 micocat:pcr那管全load嗎 還是只是被稀釋了看不到 05/08 18:10
7F：推 micocat:拿去transform看看就知道是不是不見啦 05/08 18:15
8F：推 Remin:template DNA多大？超過10K就不好做，換taq或把gene換到 05/09 13:52
9F：→ Remin:比較小的vector如pUC19,pGEM3Z 再進行突變 05/09 13:54
10F：推 ppppai:是用site-directed kit嗎? 05/13 20:15