作者marshroom (从来都没叫过我北鼻)
看板Biotech
标题[求救]永远成功不了的定点突变
时间Wed May 7 18:31:09 2008
各位 大家好
我第一次PO文....
是这样的 在下 从去年暑假到现在做了不下二十次的定点突变
但是呢
连一个鬼东西都没有给我出来
後来发现是我的template在超过95度下会不见.....
这个到底是舍麽原因呢???
叹~~~
小的 已试过 请人代抽plasmid以及换人做做看等方式
似乎 未能找到真正失败的原因.....
天阿
连老板都说这种卡到阴的事情他都没遇过
可以请各位......救救我吗?
感激不尽
再不行 我就要去求签了
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.22.18.84
1F：推 Locutus:请问什麽叫不见，你怎麽知道不见了，因为我也想知道我的 05/07 23:14
2F：→ Locutus:是不是不见了 05/07 23:15
3F：→ marshroom:那个 跑完PCR机器 去跑胶 一个放CONTRAL 一个用SAMPLE 05/08 10:24
4F：→ marshroom:然後 sample的band不见了 05/08 10:28
5F：→ marshroom:sample是只有template....跟二次水 跑cycle然後就都不见 05/08 10:30
6F：推 micocat:pcr那管全load吗 还是只是被稀释了看不到 05/08 18:10
7F：推 micocat:拿去transform看看就知道是不是不见啦 05/08 18:15
8F：推 Remin:template DNA多大？超过10K就不好做，换taq或把gene换到 05/09 13:52
9F：→ Remin:比较小的vector如pUC19,pGEM3Z 再进行突变 05/09 13:54
10F：推 ppppai:是用site-directed kit吗? 05/13 20:15