作者annesamuel (as)
看板Biotech
標題Re: [求救] 請問有關PCR的問題
時間Wed Jan 16 16:29:46 2008
※ 引述《annesamuel (as)》之銘言：
: ※ 引述《annesamuel (as)》之銘言：
: : 我的sample是細菌的DNA
: : Negative control 一直有band
: : 各種污染情況都有考慮過了
: : 包括水, primer, Taq.Tip, eppendof.. 等等
: : 不知道是那裡出了問題
: 已重新做過很多次
: 所有的東西都換新的
: dNTP是附加在 Taq Mix裡
: Taq Mix 也是拿全新的
: 跑電泳的膠也check過
: 沒loading sample時 是沒有 band的
: sorry, 我不知道如何把電泳的圖檔Po 上去
我的sample跑出還的長度大約 0.5Kb
如果annealing temp 提高 negative control 的band就不見了
但我的sample跑出來的量就非常少非常少
有的sample甚至跑不出來
primer dimer的可能性也有考慮過
也有請我學妹做 結果也是一樣
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◆ From: 140.117.91.184
1F：推 albertwang:猜問題應該出在水 說不定你的含菌量出了問題 猜的 01/16 19:26
2F：→ albertwang:拿水去劃一盤試試 會這樣猜是因為你的sample是細菌 01/16 19:30
3F：推 sGoat:把你的primer丟出來我幫你用軟體算一下吧,看來是dimer的問題 01/16 23:39