作者annesamuel (as)
看板Biotech
标题Re: [求救] 请问有关PCR的问题
时间Wed Jan 16 16:29:46 2008
※ 引述《annesamuel (as)》之铭言：
: ※ 引述《annesamuel (as)》之铭言：
: : 我的sample是细菌的DNA
: : Negative control 一直有band
: : 各种污染情况都有考虑过了
: : 包括水, primer, Taq.Tip, eppendof.. 等等
: : 不知道是那里出了问题
: 已重新做过很多次
: 所有的东西都换新的
: dNTP是附加在 Taq Mix里
: Taq Mix 也是拿全新的
: 跑电泳的胶也check过
: 没loading sample时 是没有 band的
: sorry, 我不知道如何把电泳的图档Po 上去
我的sample跑出还的长度大约 0.5Kb
如果annealing temp 提高 negative control 的band就不见了
但我的sample跑出来的量就非常少非常少
有的sample甚至跑不出来
primer dimer的可能性也有考虑过
也有请我学妹做 结果也是一样
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.117.91.184
1F：推 albertwang:猜问题应该出在水 说不定你的含菌量出了问题 猜的 01/16 19:26
2F：→ albertwang:拿水去划一盘试试 会这样猜是因为你的sample是细菌 01/16 19:30
3F：推 sGoat:把你的primer丢出来我帮你用软体算一下吧,看来是dimer的问题 01/16 23:39