作者JinMinHo0626 (想念我的單眼皮男孩~敏湖)
看板Biotech
標題[求救] 有關HEK293 transfect的實驗.....
時間Thu Nov 15 17:39:41 2007
我最近用Hek293細胞做實驗
這株細胞是不是本身就很敏感?
非常容易飄起來....
今天我seeding 4x10的5次方在6well盤中
用2ug DNA:5ul lipo做
剛剛4小時去看....大部分都飄起來了
現在頭很痛~~~~
這株細胞transfect方面是不是有些需注意的地方？
例如細胞數量...lipo的使用...後續的方法
不知道哪位可以大約幫我解惑
謝謝@_@
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.139.89
1F：推 liuse:你用lipo搞293當然飄的兇 用calcium phosphate 11/15 18:05
2F：推 liuse:而且你的lipo好像用的太多了 for 6-well 11/15 18:11
3F：推 JinMinHo0626:那有什麼好建議的...因為我們家都是用lipo... 11/15 18:24
4F：→ JinMinHo0626:如果還是要用LIPO的話,就只能這樣嗎？ 11/15 18:25
5F：推 liuse:CaCl2和HBS都可以自己配 11/15 18:46
6F：推 kirby0415:改用ad293如何?我覺得ad比Hek不容易飄耶.... 11/15 20:29
7F：推 yuchipeter:可以用1ugDNA:1.5ul lipo for 6-well, good luck! 11/15 21:07
8F：推 driws:我DNA跟lipo的比例為1:1 HEK293非常好transfection 11/15 22:38
9F：→ driws:對溫度敏感 加溫使用的buffer/medium並從邊緣加可改善飄起뀠 11/15 22:40
10F：→ JinMinHo0626:謝謝大家的幫忙,那想請問大約反應多久補MEDIUM呢? 11/15 23:06
11F：推 yuchipeter:4 hr to O/N 可補medium 11/16 19:12