作者JinMinHo0626 (想念我的单眼皮男孩~敏湖)
看板Biotech
标题[求救] 有关HEK293 transfect的实验.....
时间Thu Nov 15 17:39:41 2007
我最近用Hek293细胞做实验
这株细胞是不是本身就很敏感?
非常容易飘起来....
今天我seeding 4x10的5次方在6well盘中
用2ug DNA:5ul lipo做
刚刚4小时去看....大部分都飘起来了
现在头很痛~~~~
这株细胞transfect方面是不是有些需注意的地方？
例如细胞数量...lipo的使用...後续的方法
不知道哪位可以大约帮我解惑
谢谢@_@
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.139.89
1F：推 liuse:你用lipo搞293当然飘的凶 用calcium phosphate 11/15 18:05
2F：推 liuse:而且你的lipo好像用的太多了 for 6-well 11/15 18:11
3F：推 JinMinHo0626:那有什麽好建议的...因为我们家都是用lipo... 11/15 18:24
4F：→ JinMinHo0626:如果还是要用LIPO的话,就只能这样吗？ 11/15 18:25
5F：推 liuse:CaCl2和HBS都可以自己配 11/15 18:46
6F：推 kirby0415:改用ad293如何?我觉得ad比Hek不容易飘耶.... 11/15 20:29
7F：推 yuchipeter:可以用1ugDNA:1.5ul lipo for 6-well, good luck! 11/15 21:07
8F：推 driws:我DNA跟lipo的比例为1:1 HEK293非常好transfection 11/15 22:38
9F：→ driws:对温度敏感 加温使用的buffer/medium并从边缘加可改善飘起뀠 11/15 22:40
10F：→ JinMinHo0626:谢谢大家的帮忙,那想请问大约反应多久补MEDIUM呢? 11/15 23:06
11F：推 yuchipeter:4 hr to O/N 可补medium 11/16 19:12