作者mournermind (阿矇)
看板Biotech
標題Re: [問題] 關於western blotting的呈色
時間Wed Nov 7 02:29:41 2007
※ 引述《LIENkt (蓮讞)》之銘言：
: 想請教大家
: 在western blotting最後的呈色中
: 我知道的有ECL呈色還有HRP跟AP
: 它們之間的差異是什麼？
: 為什麼有些是要壓底片有些是直接呈色？
: 謝謝
我們實驗室是用AP...我印象中AP的原理是用2抗上的一個kinase(忘了是啥)
將BCIP 跟NTP中的某個東西加上磷酸根後形成formazon後沉澱呈色
(molecular cloning中很詳細)壓底片的好處是可以一壓再壓而且可以壓不同抗體
還是不同顏色的樣子(不好意思只聽過沒做過... ...)不過我聽學長姐說...
AP呈色比壓片明顯及漂亮多了:) 希望有幫助 囧rz
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◆ From: 140.113.55.220
1F：推 bluecsky:壓片是能夠一次壓好幾張沒錯..不過顏色應該都一樣 11/07 09:15
2F：→ bluecsky:應該只有黑色而已吧..壓不同抗體應該是說 11/07 09:16
3F：→ bluecsky:一張底片能夠壓好幾張membrane.. 11/07 09:17
4F：→ bluecsky:AP的顏色比較漂亮啦..壓片的靈敏度比較高吧 11/07 09:17
5F：→ bluecsky:壓的時間拉長可以讓一些不明顯的也顯示出來 11/07 09:18
6F：推 EsMirada:壓片的話膜可以strip重複壓不同的抗體..各有優缺點 11/07 11:57
7F：推 roddic:=_= AP就是alkaline phosphatase 不是kinase 11/07 13:38
8F：推 nixo:壓片靈敏度較高，可以拉長時間壓。AP也有能冷光呈色的受質 11/07 15:27
9F：推 mournermind:對啦是alkaline phosphatase 把磷丟到substract上.. 11/07 17:55