作者mournermind (阿蒙)
看板Biotech
标题Re: [问题] 关於western blotting的呈色
时间Wed Nov 7 02:29:41 2007
※ 引述《LIENkt (莲谳)》之铭言：
: 想请教大家
: 在western blotting最後的呈色中
: 我知道的有ECL呈色还有HRP跟AP
: 它们之间的差异是什麽？
: 为什麽有些是要压底片有些是直接呈色？
: 谢谢
我们实验室是用AP...我印象中AP的原理是用2抗上的一个kinase(忘了是啥)
将BCIP 跟NTP中的某个东西加上磷酸根後形成formazon後沉淀呈色
(molecular cloning中很详细)压底片的好处是可以一压再压而且可以压不同抗体
还是不同颜色的样子(不好意思只听过没做过... ...)不过我听学长姐说...
AP呈色比压片明显及漂亮多了:) 希望有帮助 囧rz
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.55.220
1F：推 bluecsky:压片是能够一次压好几张没错..不过颜色应该都一样 11/07 09:15
2F：→ bluecsky:应该只有黑色而已吧..压不同抗体应该是说 11/07 09:16
3F：→ bluecsky:一张底片能够压好几张membrane.. 11/07 09:17
4F：→ bluecsky:AP的颜色比较漂亮啦..压片的灵敏度比较高吧 11/07 09:17
5F：→ bluecsky:压的时间拉长可以让一些不明显的也显示出来 11/07 09:18
6F：推 EsMirada:压片的话膜可以strip重复压不同的抗体..各有优缺点 11/07 11:57
7F：推 roddic:=_= AP就是alkaline phosphatase 不是kinase 11/07 13:38
8F：推 nixo:压片灵敏度较高，可以拉长时间压。AP也有能冷光呈色的受质 11/07 15:27
9F：推 mournermind:对啦是alkaline phosphatase 把磷丢到substract上.. 11/07 17:55