作者mournermind (阿矇)
看板Biotech
標題[求救] 想請問關於sonication
時間Wed Nov 7 01:19:16 2007
我目前遇到一個很奇怪的問題
我目前的protein是soluble的
在我induction完後我會先進行一次SDS PAGE分析看是否誘導成功
而目前我遇到的情況都是:
1.
induction完後我會取一些樣本先進行sonication看是否成功誘導出soluble product
我取OD600 = 1的菌 1ml 離心後加入400 microliter的binding bf做sonication
打一秒停一秒共打三分鐘 ------->可看到明顯的soluble protein
2.當我放心的將所有induction的菌(200c.c)加入20c.c的binding bf中打(
打一秒停一秒 共打六分)後卻發現.....完全不見我要的soluble product....
怎麼會這樣....有哪位大神有經驗的嗎....orz
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.55.220
1F：推 liuse:我一次都打五秒耶 不知道是不是強度的問題 11/07 01:47
2F：→ liuse:from 1 表示你的protein有被induce出來 11/07 01:47
3F：→ liuse:你有先破菌嗎? 11/07 01:48
4F：→ liuse:比如說 加完binding buff後 冷熱個幾次 11/07 01:48
5F：推 runpapa0520:你打的不夠久吧 體積加大時間要拉長阿 怕沒破 11/07 23:03