作者mournermind (阿蒙)
看板Biotech
标题[求救] 想请问关於sonication
时间Wed Nov 7 01:19:16 2007
我目前遇到一个很奇怪的问题
我目前的protein是soluble的
在我induction完後我会先进行一次SDS PAGE分析看是否诱导成功
而目前我遇到的情况都是:
1.
induction完後我会取一些样本先进行sonication看是否成功诱导出soluble product
我取OD600 = 1的菌 1ml 离心後加入400 microliter的binding bf做sonication
打一秒停一秒共打三分钟 ------->可看到明显的soluble protein
2.当我放心的将所有induction的菌(200c.c)加入20c.c的binding bf中打(
打一秒停一秒 共打六分)後却发现.....完全不见我要的soluble product....
怎麽会这样....有哪位大神有经验的吗....orz
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.55.220
1F：推 liuse:我一次都打五秒耶 不知道是不是强度的问题 11/07 01:47
2F：→ liuse:from 1 表示你的protein有被induce出来 11/07 01:47
3F：→ liuse:你有先破菌吗? 11/07 01:48
4F：→ liuse:比如说 加完binding buff後 冷热个几次 11/07 01:48
5F：推 runpapa0520:你打的不够久吧 体积加大时间要拉长阿 怕没破 11/07 23:03