作者genius012 (過了1/2個大學生活...)
看板Biotech
標題[求救] 萃取細菌genomic DNA
時間Mon Oct 15 23:33:26 2007
請問 如果萃取細菌genomic DNA
能不能用Alkaline lysis 方法
在加入MX3 buffer離心後
留下沉澱物(genomic DNA,protein,少量plasmid DNA)
去掉上清液(大都plasmid DNA)
然後再用PCI或CI等等去掉protein 留下的DNA
就是要萃取的genomic DNA 這樣的方法可行嗎?
或是有其他可以把genomic DNA跟plasmid DNA兩者分開的方法?
學校實驗課 儀器不多不高級 能做出純度高的當然更好
謝謝各位!!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 59.113.187.217
1F：推 Crow22312:烏鴉是沒用過(也沒聽說過)您說的方法抽 genomic DNA ... 10/16 02:55
2F：→ Crow22312:不過烏鴉知道一些線上的傳統方法或許會符合您的需求... 10/16 02:58
4F：→ Crow22312:就加減參考吧... 因為MX3的鹽類(HOAc/KOAc?)下去以後... 10/16 03:00
5F：→ Crow22312:應該就不容易把 genomic DNA 完整的取回來了, 它們 10/16 03:01
6F：→ Crow22312:很容易斷裂... 10/16 03:02
7F：推 Crow22312:非常純的 genomic DNA 純化除了用 kit 那套 spin-column 10/16 03:27
8F：→ Crow22312:方法外烏鴉就不清楚了, 還望知道的高人補充 ._./ 10/16 03:28
9F：推 elin116:這種方式我用過 (如果你指的M3 是所謂的 HOAc/KOAc 的話) 10/16 18:18
10F：→ elin116:另外有些人把你那種作法 適用在較大的plasmid 也有人用 10/16 18:20
11F：→ elin116:NH4OAc 10/16 18:22
12F：推 elin116:抱歉喔 沒有看到 Genomic DNA 哈哈 拍謝啦 10/16 18:33