作者genius012 (过了1/2个大学生活...)
看板Biotech
标题[求救] 萃取细菌genomic DNA
时间Mon Oct 15 23:33:26 2007
请问 如果萃取细菌genomic DNA
能不能用Alkaline lysis 方法
在加入MX3 buffer离心後
留下沉淀物(genomic DNA,protein,少量plasmid DNA)
去掉上清液(大都plasmid DNA)
然後再用PCI或CI等等去掉protein 留下的DNA
就是要萃取的genomic DNA 这样的方法可行吗?
或是有其他可以把genomic DNA跟plasmid DNA两者分开的方法?
学校实验课 仪器不多不高级 能做出纯度高的当然更好
谢谢各位!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 59.113.187.217
1F:推 Crow22312:乌鸦是没用过(也没听说过)您说的方法抽 genomic DNA ... 10/16 02:55
2F:→ Crow22312:不过乌鸦知道一些线上的传统方法或许会符合您的需求... 10/16 02:58
4F:→ Crow22312:就加减参考吧... 因为MX3的盐类(HOAc/KOAc?)下去以後... 10/16 03:00
5F:→ Crow22312:应该就不容易把 genomic DNA 完整的取回来了, 它们 10/16 03:01
6F:→ Crow22312:很容易断裂... 10/16 03:02
7F:推 Crow22312:非常纯的 genomic DNA 纯化除了用 kit 那套 spin-column 10/16 03:27
8F:→ Crow22312:方法外乌鸦就不清楚了, 还望知道的高人补充 ._./ 10/16 03:28
9F:推 elin116:这种方式我用过 (如果你指的M3 是所谓的 HOAc/KOAc 的话) 10/16 18:18
10F:→ elin116:另外有些人把你那种作法 适用在较大的plasmid 也有人用 10/16 18:20
11F:→ elin116:NH4OAc 10/16 18:22
12F:推 elin116:抱歉喔 没有看到 Genomic DNA 哈哈 拍谢啦 10/16 18:33