※ 引述《[email protected] (槍王)》之銘言： > 請教各位前輩有關微生物實驗的無菌操作， > 這些問題看起來似乎都很幼稚， > 但在下原本不是學生物領域的， > 研究室也剛要投入生物科技領域， > 懇請各位撥冗指正下面的問題。 > 要把滅完菌的東西要放到無菌操作台之前會接觸空氣， > 要不要對這些物品的表面噴酒精消毒後，再放入? 要 滅完菌的 或者是買來就是無菌的 放入操作台以前都要再噴過酒精 比較仔細一點的會在放進操作台以後再用 UV 照半小時以上 前面有網友提到要不要用擦手紙擦 答案是 要用 "噴過酒精的擦手紙" 擦 目的是不是把手整個擦乾 而是 1. 確定讓酒精均勻分布在手（手套）上 2. 避免手上整滴整滴的酒精造成操作上的困擾與危險 > 2.拋棄式培養皿的儲存及使用。 > a.滅完菌塑膠拋棄式培養皿一買來後，大家都怎麼儲存的? 買來即是無菌 隨意放置（？）即可 呃 基本上避免大量灰塵 水花四濺 蛇虫蚊蚋蠱毒魍魎四處橫行的地方就好 > b.儲存時，正放、倒放有沒有關係? 買來即是無菌且沒有拆封的 基本上怎麼放都沒有關係 > c.是不是袋子一打開，那一包就要用完? 怪問題 不用完要拿去幹麻？拿回家養綠豆芽還是裝肥皂？ 如果你是問是不是要 "一次" 用完 基本上不需要。 但是如果貴實驗室的做法是 滅菌／無菌物品放在操作台外拆封 再把需要的數量拿到操作台內 則那一袋滅菌／無菌物品最好盡快用完 > d.要放到無菌操作台前，要不要對這些物品的表面噴酒精消毒? 看情況 有人是把整個滅菌／無菌器械耗材的 "包裝" 拿進操作台內 沒用完的就放在操作台裡面照 UV 下次繼續用 有人是放在外面只拿需要的量進入操作台 反正 任何東西進操作台前都要噴就對了 相對的 整個包裝已經在操作台以內 只是從包裝中拿出來用 就不需要 > e.要拋棄前，是否整個含培養基一起滅菌? 看你是什麼培養基 養什麼 原則上養菌的都要滅 細胞培養的培養基通常沒有強制規定 但是加有抗生素的細胞培養用培養基 倒掉以前先滅過 是比較環保的做法 > 3.塑膠品的滅菌(autoclave)。 > a.市售滅菌過的拋棄式塑膠培養皿及滅菌過的tip， > 使用前需不需要再滅菌過，以確保裡面無菌? 原則上不需要 且通常那些產品是用 gamma-ray 滅菌 貴實驗室有 gamma-ray 設備可用 當然也可以一滅再滅 滅到爽 > b.螺旋蓋試管裡面裝培養基的時候，螺旋塑膠蓋可以一起滅菌嗎? 不懂你說的是哪種容器 以及為何要把培養基裝在試管裡面滅菌 如果是使用後的培養基 準備要拋棄的 那就沒差 融就讓他融 如果是新配的 通常是把大瓶裝拿去滅 使用時再從容器裡取出需要的量裝到滅菌／無菌的小容器 > c.有哪些塑膠品是不必或不行進行滅菌? 要如何分辨呢? READ THE FUCKING MANUAL!!!! > 4.玻璃培養皿的滅菌。 > 玻璃培養皿滅菌時，上下蓋合起來，外包報紙進行滅菌， > 這樣高溫蒸氣有孔隙進入培養皿內部滅菌嗎? 把你用報紙包起來拿去滅菌你覺得你會沒事嗎？ 另外 正因如此 滅完還是要晾乾 最好放烘箱 或是高級一點的機器有烘乾功能 > 5.agar培養基之滅菌。 > 看書上寫，agar用flask調好後，需要用棉塞塞住並包鋁箔紙，才能滅菌。 > 請問可否只包鋁箔紙就去滅菌? 可以（視滅菌裝置機形而定） 也可以用血清瓶裝起來 瓶蓋鬆鬆地蓋上拿去滅 > 6.消毒用酒精濃度。 > 看到書上寫酒精濃度有70%也有75%， > 請問大家多用那種濃度呢? 不重要 七十到八十之間即可 實際差異不大 -- And my soul from out that shadow that lies floating on the floor 在那地板上浮動的影子中的我的靈魂 Shall be lifted- nevermore! 將永不再起... --The Raven by E.A.Poe -- ※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> ◆ From: 192.5.109.49