※ 引述《[email protected] (枪王)》之铭言： > 请教各位前辈有关微生物实验的无菌操作， > 这些问题看起来似乎都很幼稚， > 但在下原本不是学生物领域的， > 研究室也刚要投入生物科技领域， > 恳请各位拨冗指正下面的问题。 > 要把灭完菌的东西要放到无菌操作台之前会接触空气， > 要不要对这些物品的表面喷酒精消毒後，再放入? 要 灭完菌的 或者是买来就是无菌的 放入操作台以前都要再喷过酒精 比较仔细一点的会在放进操作台以後再用 UV 照半小时以上 前面有网友提到要不要用擦手纸擦 答案是 要用 "喷过酒精的擦手纸" 擦 目的是不是把手整个擦乾 而是 1. 确定让酒精均匀分布在手（手套）上 2. 避免手上整滴整滴的酒精造成操作上的困扰与危险 > 2.抛弃式培养皿的储存及使用。 > a.灭完菌塑胶抛弃式培养皿一买来後，大家都怎麽储存的? 买来即是无菌 随意放置（？）即可 呃 基本上避免大量灰尘 水花四溅 蛇虫蚊蚋蛊毒魍魉四处横行的地方就好 > b.储存时，正放、倒放有没有关系? 买来即是无菌且没有拆封的 基本上怎麽放都没有关系 > c.是不是袋子一打开，那一包就要用完? 怪问题 不用完要拿去干麻？拿回家养绿豆芽还是装肥皂？ 如果你是问是不是要 "一次" 用完 基本上不需要。 但是如果贵实验室的做法是 灭菌／无菌物品放在操作台外拆封 再把需要的数量拿到操作台内 则那一袋灭菌／无菌物品最好尽快用完 > d.要放到无菌操作台前，要不要对这些物品的表面喷酒精消毒? 看情况 有人是把整个灭菌／无菌器械耗材的 "包装" 拿进操作台内 没用完的就放在操作台里面照 UV 下次继续用 有人是放在外面只拿需要的量进入操作台 反正 任何东西进操作台前都要喷就对了 相对的 整个包装已经在操作台以内 只是从包装中拿出来用 就不需要 > e.要抛弃前，是否整个含培养基一起灭菌? 看你是什麽培养基 养什麽 原则上养菌的都要灭 细胞培养的培养基通常没有强制规定 但是加有抗生素的细胞培养用培养基 倒掉以前先灭过 是比较环保的做法 > 3.塑胶品的灭菌(autoclave)。 > a.市售灭菌过的抛弃式塑胶培养皿及灭菌过的tip， > 使用前需不需要再灭菌过，以确保里面无菌? 原则上不需要 且通常那些产品是用 gamma-ray 灭菌 贵实验室有 gamma-ray 设备可用 当然也可以一灭再灭 灭到爽 > b.螺旋盖试管里面装培养基的时候，螺旋塑胶盖可以一起灭菌吗? 不懂你说的是哪种容器 以及为何要把培养基装在试管里面灭菌 如果是使用後的培养基 准备要抛弃的 那就没差 融就让他融 如果是新配的 通常是把大瓶装拿去灭 使用时再从容器里取出需要的量装到灭菌／无菌的小容器 > c.有哪些塑胶品是不必或不行进行灭菌? 要如何分辨呢? READ THE FUCKING MANUAL!!!! > 4.玻璃培养皿的灭菌。 > 玻璃培养皿灭菌时，上下盖合起来，外包报纸进行灭菌， > 这样高温蒸气有孔隙进入培养皿内部灭菌吗? 把你用报纸包起来拿去灭菌你觉得你会没事吗？ 另外 正因如此 灭完还是要晾乾 最好放烘箱 或是高级一点的机器有烘乾功能 > 5.agar培养基之灭菌。 > 看书上写，agar用flask调好後，需要用棉塞塞住并包铝箔纸，才能灭菌。 > 请问可否只包铝箔纸就去灭菌? 可以（视灭菌装置机形而定） 也可以用血清瓶装起来 瓶盖松松地盖上拿去灭 > 6.消毒用酒精浓度。 > 看到书上写酒精浓度有70%也有75%， > 请问大家多用那种浓度呢? 不重要 七十到八十之间即可 实际差异不大 -- And my soul from out that shadow that lies floating on the floor 在那地板上浮动的影子中的我的灵魂 Shall be lifted- nevermore! 将永不再起... --The Raven by E.A.Poe -- ※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> ◆ From: 192.5.109.49