作者tirecake (紐西蘭大白兔)
看板Biotech
標題Re: [問題] 請問培養過HUVEC的人
時間Sun Sep 23 10:20:04 2007
※ 引述《albertwang (會思考的魚)》之銘言：
: ※ 引述《pipi14 (lalala)》之銘言：
: : 想請問板上有培養過HUVEC的前輩們,
: 我養的是直接從cord來的
: 不知道會不會一樣
: : HUVEC的touch time以及soubling time大約是多少呢?
這個約1hr 如果是DOUBLING 三四代前的細胞 約三天
五代後約一周 七代就一定收來做實驗
再養下去會變性 變不是huvec
: : 剛訂購的細胞來時,
: : 要用離心來去掉DMSO還是加多一點medium稀釋DMSO?
不能離心 讓他趕快貼後 當天換新medium(約1~2小時)
: : 當我拿前一批凍的細胞出來解凍時有沒有加都沒差
: 還有在培養HUVEC時有沒有什麼注意事項可以讓細胞長的比較健康呢?
: : 一定要加LSGS然後只要10%FBS
養太久真的不好 會出現超多代謝物
: 目前我medium已經配好了,
: : 在等待訂購細胞的到來,
: : 但是已經聽過好多人說過好難養好難養,
: : 他除了長的慢以外其他都健健康康的
: 不過剛好讓我偷懶一周通常只能作一次實驗(WB)
: 不過我還是三天給他一次新的medium但不分喔
: 再加上細胞和medium(含ECGS,heparin,20% FBS)又貴得嚇人,
: : 很擔心會把它搞死或不健康,
: : 因此希望有經驗的大大可以幫個忙,
: : 謝謝~~
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走召月土火闌!
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◆ From: 61.62.195.21
1F：推 pipi14:哇~真是太感謝了!所以細胞貼的時間只要1~2小時就夠了嗎? 09/24 12:02
2F：推 tirecake:你可以觀察看看 我一早分盤 都用5cc medium/10公分dish讓 09/25 20:05
3F：→ tirecake:他貼 中午就把沒貼的吸掉 換上新MEDIUM 沒貼的你放到3公 09/25 20:05
4F：→ tirecake:分DISH讓他貼 應該也不太會上去喔~ 09/25 20:06
5F：推 qmorechen:記得要貼的Flask、Dish都要coating過Gelatin喔 09/28 16:21