作者tirecake (纽西兰大白兔)
看板Biotech
标题Re: [问题] 请问培养过HUVEC的人
时间Sun Sep 23 10:20:04 2007
※ 引述《albertwang (会思考的鱼)》之铭言：
: ※ 引述《pipi14 (lalala)》之铭言：
: : 想请问板上有培养过HUVEC的前辈们,
: 我养的是直接从cord来的
: 不知道会不会一样
: : HUVEC的touch time以及soubling time大约是多少呢?
这个约1hr 如果是DOUBLING 三四代前的细胞 约三天
五代後约一周 七代就一定收来做实验
再养下去会变性 变不是huvec
: : 刚订购的细胞来时,
: : 要用离心来去掉DMSO还是加多一点medium稀释DMSO?
不能离心 让他赶快贴後 当天换新medium(约1~2小时)
: : 当我拿前一批冻的细胞出来解冻时有没有加都没差
: 还有在培养HUVEC时有没有什麽注意事项可以让细胞长的比较健康呢?
: : 一定要加LSGS然後只要10%FBS
养太久真的不好 会出现超多代谢物
: 目前我medium已经配好了,
: : 在等待订购细胞的到来,
: : 但是已经听过好多人说过好难养好难养,
: : 他除了长的慢以外其他都健健康康的
: 不过刚好让我偷懒一周通常只能作一次实验(WB)
: 不过我还是三天给他一次新的medium但不分喔
: 再加上细胞和medium(含ECGS,heparin,20% FBS)又贵得吓人,
: : 很担心会把它搞死或不健康,
: : 因此希望有经验的大大可以帮个忙,
: : 谢谢~~
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走召月土火阑!
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◆ From: 61.62.195.21
1F：推 pipi14:哇~真是太感谢了!所以细胞贴的时间只要1~2小时就够了吗? 09/24 12:02
2F：推 tirecake:你可以观察看看 我一早分盘 都用5cc medium/10公分dish让 09/25 20:05
3F：→ tirecake:他贴 中午就把没贴的吸掉 换上新MEDIUM 没贴的你放到3公 09/25 20:05
4F：→ tirecake:分DISH让他贴 应该也不太会上去喔~ 09/25 20:06
5F：推 qmorechen:记得要贴的Flask、Dish都要coating过Gelatin喔 09/28 16:21