作者ariesmars (Mars)
看板Biotech
標題[問題] 有人做過gelatin zymography嗎???
時間Thu Aug 9 12:19:39 2007
嗯....
有點不知該怎麼問
有人做過gelatin zymography嗎??
最近實驗室再做這個
但是為了處理sample 所以SAMPLE沒用beta-mercaptol ethanol處理
問題來嘍
就是正常的gel跑出來 染色
會有兩條bend (一條是MMP9 一條是MMP2)
正常來說應該整片gel都是藍的很均勻的
但是跑出來染完色後
會發現那片gel上半部顏色會比較淺
就是
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██████████ ◢███ 就是這邊變比較淡
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想在問一下喔
就是在72kd~92kd那兩條bend之間 還有好多好小好小細細的bend
想問一下這兩個問題是為什麼啊???有人知道嗎?????
感謝!
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◆ From: 140.128.68.244
※ 編輯: ariesmars 來自: 140.128.68.244 (08/09 12:22)
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1F：推 alulu:你有把上層膠切掉嗎? 你電壓多少?跑多久? 08/09 13:11
2F：推 Locutus:分上下兩半我以前也碰過,最後發現是running buffer不fresh 08/09 14:54
3F：→ Locutus:第二個問題我沒碰過,如果要我猜一下的話有可能是其他MMP 08/09 14:57
4F：→ Locutus:或是膠聚合不好造成的拖曳 08/09 14:59
5F：推 nerdz:中間的部分一班認為是active form 的gelatinase (MMP-9) 08/10 01:24
6F：→ nerdz:空白處可能是gelatin跑掉了..交的%數根電壓數都會影響 08/10 01:24