作者ariesmars (Mars)
看板Biotech
标题[问题] 有人做过gelatin zymography吗???
时间Thu Aug 9 12:19:39 2007
嗯....
有点不知该怎麽问
有人做过gelatin zymography吗??
最近实验室再做这个
但是为了处理sample 所以SAMPLE没用beta-mercaptol ethanol处理
问题来喽
就是正常的gel跑出来 染色
会有两条bend (一条是MMP9 一条是MMP2)
正常来说应该整片gel都是蓝的很均匀的
但是跑出来染完色後
会发现那片gel上半部颜色会比较浅
就是
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██████████ ◢███ 就是这边变比较淡
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想在问一下喔
就是在72kd~92kd那两条bend之间 还有好多好小好小细细的bend
想问一下这两个问题是为什麽啊???有人知道吗?????
感谢!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.68.244
※ 编辑: ariesmars 来自: 140.128.68.244 (08/09 12:22)
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1F：推 alulu:你有把上层胶切掉吗? 你电压多少?跑多久? 08/09 13:11
2F：推 Locutus:分上下两半我以前也碰过,最後发现是running buffer不fresh 08/09 14:54
3F：→ Locutus:第二个问题我没碰过,如果要我猜一下的话有可能是其他MMP 08/09 14:57
4F：→ Locutus:或是胶聚合不好造成的拖曳 08/09 14:59
5F：推 nerdz:中间的部分一班认为是active form 的gelatinase (MMP-9) 08/10 01:24
6F：→ nerdz:空白处可能是gelatin跑掉了..交的%数根电压数都会影响 08/10 01:24