※ 引述《anneying (12)》之銘言： : 最近抽plasmid 測出來的260/280都好高 : 最高到2.3 而且plasmid的濃度都是之前的好幾倍 : 想說是不是菌養太多了，使的RNAse 作用不夠力 才會讓ratio過高 : 想請問大家起初在挑colony 的時候 ，都是先在LB agar上面養多久阿? : 挑多大的colony呢? : 我用的是GIAGEN MAXI 之前抽出來都可以用，最近已經失敗好幾次 : 所上8月底要review，抽不到plasmid根本不能做實驗 : 請大家幫忙我了 拜託!! 謝謝! 不論是 DNA 或 RNA 都是看 260 的吸收啊！(280 是看 protein) 所以 260/280 ratio 高和有沒有 RNA 污染應該沒有太大的關係吧！ 有沒有 RNA 污染，其實跑個 agarose gel 就很清楚了 如果有，會在約很低分子量的地方 (如50bp) 有 smear 糊糊的東西 不過 Qiagen 的 kit，應該不會有這種問題才對。 至於 transfection efficiency 變差的原因也很多 我做過 260/280 只有 1.6的，也是可以做哩 (呵呵 ^.^||) 我除了用 260 測濃度 (OD值 * 50 * 稀釋倍數) 也會再跑個膠和 marker 比較看看 transfection reagent 好像都要和 DNA 做一定比例的混合 太少或太多都做不出來喔！ --

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