作者anneying (12)
看板Biotech
標題[問題] 抽plasmid 失敗好幾次了
時間Tue Jul 10 18:49:08 2007
最近抽plasmid 測出來的260/280都好高
最高到2.3 而且plasmid的濃度都是之前的好幾倍
想說是不是菌養太多了，使的RNAse 作用不夠力 才會讓ratio過高
想請問大家起初在挑colony 的時候 ，都是先在LB agar上面養多久阿?
挑多大的colony呢?
我用的是GIAGEN MAXI 之前抽出來都可以用，最近已經失敗好幾次
所上8月底要review，抽不到plasmid根本不能做實驗
請大家幫忙我了 拜託!! 謝謝!
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◆ From: 192.192.9.1
1F：推 stemcell:Qiagen? 這家東西應該ok才是 260/280好高 不代表沒抽到 07/10 20:21
2F：→ stemcell:怎不做實驗看看 還是做了有問題？ 07/10 20:22
3F：推 aggaci:Giagen....not qiagen 07/10 20:50
4F：推 anneying:抽出來的PLASMID,transfect的效率變差..... 07/10 21:20
5F：推 blence:除了OD還可以跑gel相對定量,同時也會知道你的plasmid掛了 07/11 08:03
6F：推 anneying:我是kit是Qiagen...不好意思打錯了... 07/11 10:16
7F：推 stemcell:Giagen 是有點難念...菌養太多了 你會覺得一開使離心 07/11 12:15
8F：→ stemcell:pellet有比較大嗎？...真的RNA太多 就加多點RNAse 07/11 12:16