作者anneying (12)
看板Biotech
标题[问题] 抽plasmid 失败好几次了
时间Tue Jul 10 18:49:08 2007
最近抽plasmid 测出来的260/280都好高
最高到2.3 而且plasmid的浓度都是之前的好几倍
想说是不是菌养太多了，使的RNAse 作用不够力 才会让ratio过高
想请问大家起初在挑colony 的时候 ，都是先在LB agar上面养多久阿?
挑多大的colony呢?
我用的是GIAGEN MAXI 之前抽出来都可以用，最近已经失败好几次
所上8月底要review，抽不到plasmid根本不能做实验
请大家帮忙我了 拜托!! 谢谢!
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◆ From: 192.192.9.1
1F：推 stemcell:Qiagen? 这家东西应该ok才是 260/280好高 不代表没抽到 07/10 20:21
2F：→ stemcell:怎不做实验看看 还是做了有问题？ 07/10 20:22
3F：推 aggaci:Giagen....not qiagen 07/10 20:50
4F：推 anneying:抽出来的PLASMID,transfect的效率变差..... 07/10 21:20
5F：推 blence:除了OD还可以跑gel相对定量,同时也会知道你的plasmid挂了 07/11 08:03
6F：推 anneying:我是kit是Qiagen...不好意思打错了... 07/11 10:16
7F：推 stemcell:Giagen 是有点难念...菌养太多了 你会觉得一开使离心 07/11 12:15
8F：→ stemcell:pellet有比较大吗？...真的RNA太多 就加多点RNAse 07/11 12:16