作者shuo218 (快樂的理由)
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標題[問題] 請問抽RNA 加完isopropanol後 到底應該怎麼辦?
時間Thu Jun 21 12:42:15 2007
之前我的作法 都是加完ISOPROPANOL(稍稍搖勻後)
離心13000xg 可是後來覺得這樣抽出來的RATIO不是很好
問了學姊 學姐跟我說 加完ISOPROPANOL可以放-80 O/N
他說這樣會比較好
因為用的是TRIZOL 他的PROTOCOL寫說加完ISOPROPANOL後 直接放室溫10分鐘就可以離心
我今天用了這個方法 結果離心完 盡然什麼東西都沒有一點沉澱也沒
請問大家的經驗都是如何呢?
呼 我的RNA一直抽不好~~泣
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◆ From: 140.128.64.211
1F：推 runpapa0520:沉澱不一定看的到，繼續做70%酒精wash。 06/21 12:44
2F：推 hsturtle:加完isopropanol後要mix均勻後再靜置 06/21 13:02
3F：推 yaliu:推樓上...要混勻再靜置，靜置時間可大於10分鐘... 06/21 13:36
4F：推 u8524009:如果確定有混勻後再離心還是看不到沉澱,那有可能是你抽出 06/21 13:51
5F：→ u8524009:來的RNA量太少了,所以才沒看到沉澱 06/21 13:52
6F：推 mikis1107:恩有沉澱也不一定是好事..有可能是protein或是雜質沉澱 06/21 16:58
7F：→ mikis1107:ratio如果>2.0表示有有機溶劑在裡面,如果<1.8表示有可能 06/21 16:59
8F：→ mikis1107:有protein在其中,我們實驗室也是室溫10 min 06/21 17:01
9F：推 huhu126:嗯,沉澱不ㄧ定看得到,RNA很乾淨或很少都有可能... 06/21 20:48
10F：推 oxoox:看不見不代表不存在 測了REAL TIME就會知道 06/21 22:57
11F：推 shuo218:想再請問 我今天讓它靜置約10分鐘 怎麼顏色變成淡黃色了呢 06/22 15:21
12F：推 BILLYANG:IPA 壞暸 會產生黃色 02/24 10:53