作者shuo218 (快乐的理由)
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标题[问题] 请问抽RNA 加完isopropanol後 到底应该怎麽办?
时间Thu Jun 21 12:42:15 2007
之前我的作法 都是加完ISOPROPANOL(稍稍摇匀後)
离心13000xg 可是後来觉得这样抽出来的RATIO不是很好
问了学姊 学姐跟我说 加完ISOPROPANOL可以放-80 O/N
他说这样会比较好
因为用的是TRIZOL 他的PROTOCOL写说加完ISOPROPANOL後 直接放室温10分钟就可以离心
我今天用了这个方法 结果离心完 尽然什麽东西都没有一点沉淀也没
请问大家的经验都是如何呢?
呼 我的RNA一直抽不好~~泣
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.64.211
1F：推 runpapa0520:沉淀不一定看的到，继续做70%酒精wash。 06/21 12:44
2F：推 hsturtle:加完isopropanol後要mix均匀後再静置 06/21 13:02
3F：推 yaliu:推楼上...要混匀再静置，静置时间可大於10分钟... 06/21 13:36
4F：推 u8524009:如果确定有混匀後再离心还是看不到沉淀,那有可能是你抽出 06/21 13:51
5F：→ u8524009:来的RNA量太少了,所以才没看到沉淀 06/21 13:52
6F：推 mikis1107:恩有沉淀也不一定是好事..有可能是protein或是杂质沉淀 06/21 16:58
7F：→ mikis1107:ratio如果>2.0表示有有机溶剂在里面,如果<1.8表示有可能 06/21 16:59
8F：→ mikis1107:有protein在其中,我们实验室也是室温10 min 06/21 17:01
9F：推 huhu126:嗯,沉淀不ㄧ定看得到,RNA很乾净或很少都有可能... 06/21 20:48
10F：推 oxoox:看不见不代表不存在 测了REAL TIME就会知道 06/21 22:57
11F：推 shuo218:想再请问 我今天让它静置约10分钟 怎麽颜色变成淡黄色了呢 06/22 15:21
12F：推 BILLYANG:IPA 坏了 会产生黄色 02/24 10:53