> 我的protein在經E. coli表現後 > 破菌、離心後發現是位於inclusion body > 為了之後跑膠的方便，我用8M urea不用guanidine HCl作extraction > 卻發現protein由原來的兩條band (之前測，未破菌以western測得) > 變成了連續由約10KDa一直延伸到gel最上面的100多KDa 的 數十條bands > 請問這有可能是urea形成cyanate造成的嗎 Protein carbamylation很難避免 但是畢竟還是少部份 (你有很大量的蛋白質 只有很少量的isocyanate) 所以我覺得機會不大 建議你先確定 這些條帶都是你的蛋白質 而不是污染物 必要時 配urea溶液時不要加熱 或調到微酸 甚至用離子交換樹脂 都可以減少isocyanate -- ※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> ◆ From: 61-59-139-151.adsl.static.seed.net.tw