> 我的protein在经E. coli表现後 > 破菌、离心後发现是位於inclusion body > 为了之後跑胶的方便，我用8M urea不用guanidine HCl作extraction > 却发现protein由原来的两条band (之前测，未破菌以western测得) > 变成了连续由约10KDa一直延伸到gel最上面的100多KDa 的 数十条bands > 请问这有可能是urea形成cyanate造成的吗 Protein carbamylation很难避免 但是毕竟还是少部份 (你有很大量的蛋白质 只有很少量的isocyanate) 所以我觉得机会不大 建议你先确定 这些条带都是你的蛋白质 而不是污染物 必要时 配urea溶液时不要加热 或调到微酸 甚至用离子交换树脂 都可以减少isocyanate -- ※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> ◆ From: 61-59-139-151.adsl.static.seed.net.tw