作者content71 (羅莉飼養中...)
看板Biotech
標題[問題] extraction用urea產生的cyanate問題
時間Thu Jun 14 14:56:13 2007
是這樣的
我的protein在經E. coli表現後
破菌、離心後發現是位於inclusion body
為了之後跑膠的方便，我用8M urea不用guanidine HCl作extraction
卻發現protein由原來的兩條band (之前測，未破菌以western測得)
變成了連續由約10KDa一直延伸到gel最上面的100多KDa 的 數十條bands
請問這有可能是urea形成cyanate造成的嗎
那該如何避免產生呢
或是純化時能夠去除嗎？
感謝您的幫助!!!
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◆ From: 140.114.99.187
1F：→ content71:另外請問，Ni-NTA column buffer pH7.9以上是為了什麼阿 06/14 16:23
2F：→ content71:我是知道6.4~8.0是為了protein binding,但7.9就不懂了 06/14 16:23
3F：→ content71:還有就是，冰上和常溫的pH有些差耶，該在冰上測嗎 06/14 16:24
4F：→ content71:感謝您聽我這些笨問題喔 06/14 16:25