作者content71 (罗莉饲养中...)
看板Biotech
标题[问题] extraction用urea产生的cyanate问题
时间Thu Jun 14 14:56:13 2007
是这样的
我的protein在经E. coli表现後
破菌、离心後发现是位於inclusion body
为了之後跑胶的方便，我用8M urea不用guanidine HCl作extraction
却发现protein由原来的两条band (之前测，未破菌以western测得)
变成了连续由约10KDa一直延伸到gel最上面的100多KDa 的 数十条bands
请问这有可能是urea形成cyanate造成的吗
那该如何避免产生呢
或是纯化时能够去除吗？
感谢您的帮助!!!
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◆ From: 140.114.99.187
1F：→ content71:另外请问，Ni-NTA column buffer pH7.9以上是为了什麽阿 06/14 16:23
2F：→ content71:我是知道6.4~8.0是为了protein binding,但7.9就不懂了 06/14 16:23
3F：→ content71:还有就是，冰上和常温的pH有些差耶，该在冰上测吗 06/14 16:24
4F：→ content71:感谢您听我这些笨问题喔 06/14 16:25