作者liaschou (野獸)
看板Biotech
標題[問題] RT-PCR internal-control gene
時間Tue Jun 12 12:15:34 2007
最近在補data，但是跑RT-PCR做出cDNA，再用PCR放大後，internal control怎麼跑都
跑不齊，我跑的internal control是GAPDH，請問除了RNA在定量沒定好之外，還有沒有
別的原因會跑不齊? 因為之前跑都沒問題，所以我在想是不是有東西(試劑)壞掉?
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.68.248
1F：推 mikis1107:請問什麼是跑不齊??? 06/12 14:33
2F：推 freesoul:跑不齊是指size不一樣還是強度不一樣? 06/12 15:00
3F：推 liaschou:強度不一樣 06/12 16:54
4F：→ liaschou:不好意思，我的語文能力不太好。 06/12 16:56
5F：推 fungihsu:你有做master mix嗎? 會不會是試劑加的量有差異 06/12 17:27
6F：推 liaschou:Master mix 是什麼阿?? 06/13 00:02
7F：→ liaschou:是指先把試劑混和在同一管嗎? 我們有這樣做。 06/13 00:03
8F：→ liaschou:定量用不同的分光光度計都做出一致的數據 06/13 00:04
9F：→ liaschou:都到最後關頭，才出問題，唉!! 06/13 00:06
10F：推 b46006:pcr cycle數多一點可能band強度就會一樣了 06/13 16:38
11F：推 liaschou:但是我已經跑28 cycle，在更高就失去它的準確性了吧? 06/14 12:16