作者liaschou (野兽)
看板Biotech
标题[问题] RT-PCR internal-control gene
时间Tue Jun 12 12:15:34 2007
最近在补data，但是跑RT-PCR做出cDNA，再用PCR放大後，internal control怎麽跑都
跑不齐，我跑的internal control是GAPDH，请问除了RNA在定量没定好之外，还有没有
别的原因会跑不齐? 因为之前跑都没问题，所以我在想是不是有东西(试剂)坏掉?
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◆ From: 140.128.68.248
1F：推 mikis1107:请问什麽是跑不齐??? 06/12 14:33
2F：推 freesoul:跑不齐是指size不一样还是强度不一样? 06/12 15:00
3F：推 liaschou:强度不一样 06/12 16:54
4F：→ liaschou:不好意思，我的语文能力不太好。 06/12 16:56
5F：推 fungihsu:你有做master mix吗? 会不会是试剂加的量有差异 06/12 17:27
6F：推 liaschou:Master mix 是什麽阿?? 06/13 00:02
7F：→ liaschou:是指先把试剂混和在同一管吗? 我们有这样做。 06/13 00:03
8F：→ liaschou:定量用不同的分光光度计都做出一致的数据 06/13 00:04
9F：→ liaschou:都到最後关头，才出问题，唉!! 06/13 00:06
10F：推 b46006:pcr cycle数多一点可能band强度就会一样了 06/13 16:38
11F：推 liaschou:但是我已经跑28 cycle，在更高就失去它的准确性了吧? 06/14 12:16