作者legendhero (ming)
看板Biotech
標題[問題]DNA 定序問題
時間Fri Jun 1 00:24:38 2007
最近老師叫我拿insert gene 的plasmid去定序
看gene有沒有mutation
但都只定到一小部份,大部份都是N,而且後半段訊號會不見
plasmid跑gel 出來的size是對的
PCR完後做純化,用酒精沉澱,最後在室溫下倒著晾乾PCR產物殘留的酒精,
要等2天左右才能上機
是不是等的時間過長導致訊號不見,還是PCR出問題
我有一次在P完後,做純化,立刻上機,就做得出來
但因為一些因素,非得等2天才能上機
有那位大大能幫我解決這個問題>.<
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◆ From: 163.22.18.90
1F：推 Portland:避光? 06/01 08:38
2F：推 xenopus:insert size多大?你用幾個primer去定序? 06/01 09:28
3F：→ xenopus:當然你有確定insert在裡面嗎?有沒有digest看看? 06/01 09:29
4F：推 pshamrock:primer對嗎? 06/01 18:20
5F：推 mike0916:抽多點plasmid....直接拿plasmid定序試試看.... 06/02 01:27