作者legendhero (ming)
看板Biotech
标题[问题]DNA 定序问题
时间Fri Jun 1 00:24:38 2007
最近老师叫我拿insert gene 的plasmid去定序
看gene有没有mutation
但都只定到一小部份,大部份都是N,而且後半段讯号会不见
plasmid跑gel 出来的size是对的
PCR完後做纯化,用酒精沉淀,最後在室温下倒着晾乾PCR产物残留的酒精,
要等2天左右才能上机
是不是等的时间过长导致讯号不见,还是PCR出问题
我有一次在P完後,做纯化,立刻上机,就做得出来
但因为一些因素,非得等2天才能上机
有那位大大能帮我解决这个问题>.<
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◆ From: 163.22.18.90
1F：推 Portland:避光? 06/01 08:38
2F：推 xenopus:insert size多大?你用几个primer去定序? 06/01 09:28
3F：→ xenopus:当然你有确定insert在里面吗?有没有digest看看? 06/01 09:29
4F：推 pshamrock:primer对吗? 06/01 18:20
5F：推 mike0916:抽多点plasmid....直接拿plasmid定序试试看.... 06/02 01:27