作者hhyhuang (hhyhuang)
看板Biotech
標題[求救] 重組蛋白純化後,分子量改變了
時間Fri May 25 21:27:39 2007
最近遇到一個問題,想請教大家:
我表現一個24kDa的protein於Ecoli(BL21DE3)
,跑PAGE與control比較後,的確可以在約24kDa的位置,
看到明顯的band被誘導出來,但是,
進行His純化後,結果原本受IPTG誘導的重組protein
已經不在24kDa的位置了,跑到37kDa
但是,我用抗體又能hybid到37kDa的band,
我懷疑會不會我的protein被磷酸化了,有方法可以讓我的protein回復成
24kDa嗎?或者有方法證明我的重組蛋白在37kDa是因為被磷酸化所造成的嗎?
感激不盡~~
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◆ From: 140.112.70.89
1F：推 ssuny:磷酸化分子量應該不會差到那麼大..醣化? 05/25 23:08
2F：→ ssuny:不然試試看去磷酸化處理..看會不會恢復囉 05/25 23:09
3F：推 wensing:dimer? 有加dtt or β-ME? 05/26 00:47