作者hhyhuang (hhyhuang)
看板Biotech
标题[求救] 重组蛋白纯化後,分子量改变了
时间Fri May 25 21:27:39 2007
最近遇到一个问题,想请教大家:
我表现一个24kDa的protein於Ecoli(BL21DE3)
,跑PAGE与control比较後,的确可以在约24kDa的位置,
看到明显的band被诱导出来,但是,
进行His纯化後,结果原本受IPTG诱导的重组protein
已经不在24kDa的位置了,跑到37kDa
但是,我用抗体又能hybid到37kDa的band,
我怀疑会不会我的protein被磷酸化了,有方法可以让我的protein回复成
24kDa吗?或者有方法证明我的重组蛋白在37kDa是因为被磷酸化所造成的吗?
感激不尽~~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.70.89
1F：推 ssuny:磷酸化分子量应该不会差到那麽大..醣化? 05/25 23:08
2F：→ ssuny:不然试试看去磷酸化处理..看会不会恢复罗 05/25 23:09
3F：推 wensing:dimer? 有加dtt or β-ME? 05/26 00:47