※ 引述《transmore (小次郎)》之銘言： : 最近要開始純化重組的蛋白 : 我是使用6XHis-tag的融合蛋白 : 老板應該是偏好傳統重力流動式的 : 那些spin的、Disk的..他應該不喜歡 : (如果效果很好也請推薦一下) 其實用gravity就夠了 反正你就擺著慢慢流，說實話也不會多多少時間 反而不用平衡、不用拿來拿去，比較方便 像平常我做純化大概是 1L culture --> 160mL sample 過 column (平衡 loading wash elution) 大概也不用一小時吧 反而最耗時間的是在破菌的時候，我們的 sonicator 真是超級爛。 不知道有沒有版友可以推一下 (跪謝) : 想請問在做6xHis-tag protein純化的各位 : 請問一下你們使用的column、resin or kit : 是使用哪個牌子哪個代理商的? : 效果好嗎?價錢便宜嗎?resin可以重複使用嗎? : 感謝各位先進^^ 我自己是用 BD Talon resin 的... 是只買 resin，所有的東西都自己配 不過買 resin 沒有送那個管子，所以要和隔壁實驗室要一下 因為管子我問到的最小包裝是 pharmacia 的... 50/package = = 效果滿不錯的，雖然現在的主流是 Ni-NTA (qiagen) 當然 ni-nta 是很強啦，但是也很貴 T_T 個人覺得一般來說，如果 protein 不是太難做 或是實驗室真的很有錢... 那用 talon 的就夠了, nt 4000/10mL resin 可以重覆用啊，只要操作小心，我想用到地老天荒應該沒什麼問題 重點是要注意有沒有塞住 (灰塵或是菌的 pellet)，還有保存之類的 然後我的 buffer 都會滅一下菌啦，怕 buffer 不乾淨可能會發黴什麼的。 --

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