※ 引述《transmore (小次郎)》之铭言： : 最近要开始纯化重组的蛋白 : 我是使用6XHis-tag的融合蛋白 : 老板应该是偏好传统重力流动式的 : 那些spin的、Disk的..他应该不喜欢 : (如果效果很好也请推荐一下) 其实用gravity就够了 反正你就摆着慢慢流，说实话也不会多多少时间 反而不用平衡、不用拿来拿去，比较方便 像平常我做纯化大概是 1L culture --> 160mL sample 过 column (平衡 loading wash elution) 大概也不用一小时吧 反而最耗时间的是在破菌的时候，我们的 sonicator 真是超级烂。 不知道有没有版友可以推一下 (跪谢) : 想请问在做6xHis-tag protein纯化的各位 : 请问一下你们使用的column、resin or kit : 是使用哪个牌子哪个代理商的? : 效果好吗?价钱便宜吗?resin可以重复使用吗? : 感谢各位先进^^ 我自己是用 BD Talon resin 的... 是只买 resin，所有的东西都自己配 不过买 resin 没有送那个管子，所以要和隔壁实验室要一下 因为管子我问到的最小包装是 pharmacia 的... 50/package = = 效果满不错的，虽然现在的主流是 Ni-NTA (qiagen) 当然 ni-nta 是很强啦，但是也很贵 T_T 个人觉得一般来说，如果 protein 不是太难做 或是实验室真的很有钱... 那用 talon 的就够了, nt 4000/10mL resin 可以重覆用啊，只要操作小心，我想用到地老天荒应该没什麽问题 重点是要注意有没有塞住 (灰尘或是菌的 pellet)，还有保存之类的 然後我的 buffer 都会灭一下菌啦，怕 buffer 不乾净可能会发霉什麽的。 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 61.216.6.88