有三個基因我做了好久，只有偶而才做得出來，大多完全做不出來喔，麻煩各位高手指點我 一下，這三個基因包含後來做的兩個基因，我的試劑配法均如下： dna 3（未定量）、buffer 2.5入 primer（10 pmol/入）各2.5入 dntp（2.5mM）4入 、taq（5u/入）0.5入，水10入。 而且因為一直做不出來我還學版友把40cycle的程式均改成1分三十秒還是沒東西 drd3曾經做出來過，用的primer是寒假時訂的。程式如下： 95 6分，94 1分 55 30s 72 45秒 共跑40cycle， 72度10分，annealing溫度後來我降 成50度還是沒東西。但是50跟55度我都曾經跑出過東西來。paper寫的annealing溫是55度 a218c 94度四分，94度30秒、50度30秒（後來也有改過59度、56度、53度，56、53度均有跑出過 東西）、72度1分，共40cycle、72度10分。paper寫的 annealing溫是55度。有嘗試將 dna含量調成5入及1入，但仍沒東西。 serotonin transporter 94度5分、94度30秒、63度30秒（後來改成50、55度還是跑不出來）、72度30秒、共40cycle， 72度5分，之前63度時曾經跑出很亮的band，但現在..........paper寫的 annealing是 63度至55度間。 這三個基因是我寒假做的，大多做不出來，偶而才做得出很弱的band，但我後來訂的兩個 新基因，用一樣的材料一下子就成功了，也是用annealing溫50度做，其中一個比較不亮， 打算提高一下溫度，另一個則超亮的。 現在我只想到還沒嘗試拿別人的試劑來試，其他想不到了，高手們能不能救救我。 --

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