有三个基因我做了好久，只有偶而才做得出来，大多完全做不出来喔，麻烦各位高手指点我 一下，这三个基因包含後来做的两个基因，我的试剂配法均如下： dna 3（未定量）、buffer 2.5入 primer（10 pmol/入）各2.5入 dntp（2.5mM）4入 、taq（5u/入）0.5入，水10入。 而且因为一直做不出来我还学版友把40cycle的程式均改成1分三十秒还是没东西 drd3曾经做出来过，用的primer是寒假时订的。程式如下： 95 6分，94 1分 55 30s 72 45秒 共跑40cycle， 72度10分，annealing温度後来我降 成50度还是没东西。但是50跟55度我都曾经跑出过东西来。paper写的annealing温是55度 a218c 94度四分，94度30秒、50度30秒（後来也有改过59度、56度、53度，56、53度均有跑出过 东西）、72度1分，共40cycle、72度10分。paper写的 annealing温是55度。有尝试将 dna含量调成5入及1入，但仍没东西。 serotonin transporter 94度5分、94度30秒、63度30秒（後来改成50、55度还是跑不出来）、72度30秒、共40cycle， 72度5分，之前63度时曾经跑出很亮的band，但现在..........paper写的 annealing是 63度至55度间。 这三个基因是我寒假做的，大多做不出来，偶而才做得出很弱的band，但我後来订的两个 新基因，用一样的材料一下子就成功了，也是用annealing温50度做，其中一个比较不亮， 打算提高一下温度，另一个则超亮的。 现在我只想到还没尝试拿别人的试剂来试，其他想不到了，高手们能不能救救我。 --

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