作者jackness (麻煩陽春麵加個蛋)
看板Biotech
標題[問題] 分離有磷酸化的蛋白
時間Mon May 14 19:01:00 2007
我最近想利用western blot 的方法
將一個大約55kd的蛋白質分離
就是將他的phosphorylated form
和non-phosphorylated form分開
磷酸化的位置為serine 112
請問一下要如何分離呢??
我目前是用8x10的 BioRad 的跑膠儀器
是否該用更大的跑膠儀器
還是要用幾%的gel去跑呢
因為55kd要大不大..要小不小的.. = =
而且我參考的PAPER
可以有明顯的分離..
他們也是用western 的方法
請各位高手指點一下小弟
謝~~
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◆ From: 140.112.212.241
1F：推 saviora:可以用2D試試 05/14 19:24
2F：推 liuse:2D 1D不太可能 05/15 02:21
3F：推 Lipaty:樓上難道沒看過磷酸化的band會稍微高一點嗎? 05/18 11:22
4F：推 machin:推樓上,除此之外 我記得不同大小有不同濃度的PAGE適合跑 05/19 19:36
5F：推 shern:先用phospho-ser的抗體做IP，再做Western 05/23 22:46