作者jackness (麻烦阳春面加个蛋)
看板Biotech
标题[问题] 分离有磷酸化的蛋白
时间Mon May 14 19:01:00 2007
我最近想利用western blot 的方法
将一个大约55kd的蛋白质分离
就是将他的phosphorylated form
和non-phosphorylated form分开
磷酸化的位置为serine 112
请问一下要如何分离呢??
我目前是用8x10的 BioRad 的跑胶仪器
是否该用更大的跑胶仪器
还是要用几%的gel去跑呢
因为55kd要大不大..要小不小的.. = =
而且我参考的PAPER
可以有明显的分离..
他们也是用western 的方法
请各位高手指点一下小弟
谢~~
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◆ From: 140.112.212.241
1F：推 saviora:可以用2D试试 05/14 19:24
2F：推 liuse:2D 1D不太可能 05/15 02:21
3F：推 Lipaty:楼上难道没看过磷酸化的band会稍微高一点吗? 05/18 11:22
4F：推 machin:推楼上,除此之外 我记得不同大小有不同浓度的PAGE适合跑 05/19 19:36
5F：推 shern:先用phospho-ser的抗体做IP，再做Western 05/23 22:46