作者anotherway (Anita才是王道)
看板Biotech
標題[問題] 萃取DNA
時間Mon Apr 2 19:28:17 2007
關於萃取DNA時
如果最後沒將酒精完全揮發
pellet沒有完全乾燥就回溶
會影響PCR的結果嗎
因為老闆給我的Protocol是讓pellet自然晾乾(室溫20min)
但每次幾乎都沒乾過 = =|||
然後電泳看DNA quality 都出現一陀的亮帶兼smear...(不sharp)
PCR的結果也就時好時壞(同樣條件去跑)
請問各位高手
這個步驟出差錯會產生什麼結果
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 125.226.53.216
1F：推 lakerjackt:其實沒有很乾沒關西,對PCR來講是看你的DNA純度,酒精有댠 04/02 19:58
2F：→ lakerjackt:餘一點點,其實影響不太! 04/02 19:59
3F：推 lakerjackt:若你認為你的DNA不夠純的話,你可以把回溶的DNA在98度C 04/02 20:06
4F：→ lakerjackt:加熱3 min,在離13200rpm約5~10 min,然後把上清液吸上來 04/02 20:07
5F：→ lakerjackt:丟掉沉澱物,上清液就再當你的DNA吧 04/02 20:08
6F：推 forWinds:老闆是跟我說過可能會跑不出來...你先跑跑看吧^^ 04/02 23:22
7F：→ forWinds:我曾經幹過同樣的事...不應該說我根本忘記烘乾...那次確뤠 04/02 23:22
8F：→ forWinds:實也P的不好...但是也只是推測...因為我用的primer也還在 04/02 23:23
9F：→ forWinds:測試...並不專一 04/02 23:25
10F：推 xenopus:QIAGEN.... 04/03 09:53
11F：→ xenopus:sorry 我是回下一篇 04/03 09:53
12F：推 monchi:我是放入烘箱15MIN 或是空管離心13000rpm3min 04/04 19:13
13F：→ monchi:pcr的產物有可能會亂亂的。不然就把denature 的時間加長看갠 04/04 19:19