作者anotherway (Anita才是王道)
看板Biotech
标题[问题] 萃取DNA
时间Mon Apr 2 19:28:17 2007
关於萃取DNA时
如果最後没将酒精完全挥发
pellet没有完全乾燥就回溶
会影响PCR的结果吗
因为老板给我的Protocol是让pellet自然晾乾(室温20min)
但每次几乎都没乾过 = =|||
然後电泳看DNA quality 都出现一陀的亮带兼smear...(不sharp)
PCR的结果也就时好时坏(同样条件去跑)
请问各位高手
这个步骤出差错会产生什麽结果
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 125.226.53.216
1F：推 lakerjackt:其实没有很乾没关西,对PCR来讲是看你的DNA纯度,酒精有댠 04/02 19:58
2F：→ lakerjackt:余一点点,其实影响不太! 04/02 19:59
3F：推 lakerjackt:若你认为你的DNA不够纯的话,你可以把回溶的DNA在98度C 04/02 20:06
4F：→ lakerjackt:加热3 min,在离13200rpm约5~10 min,然後把上清液吸上来 04/02 20:07
5F：→ lakerjackt:丢掉沉淀物,上清液就再当你的DNA吧 04/02 20:08
6F：推 forWinds:老板是跟我说过可能会跑不出来...你先跑跑看吧^^ 04/02 23:22
7F：→ forWinds:我曾经干过同样的事...不应该说我根本忘记烘乾...那次确뤠 04/02 23:22
8F：→ forWinds:实也P的不好...但是也只是推测...因为我用的primer也还在 04/02 23:23
9F：→ forWinds:测试...并不专一 04/02 23:25
10F：推 xenopus:QIAGEN.... 04/03 09:53
11F：→ xenopus:sorry 我是回下一篇 04/03 09:53
12F：推 monchi:我是放入烘箱15MIN 或是空管离心13000rpm3min 04/04 19:13
13F：→ monchi:pcr的产物有可能会乱乱的。不然就把denature 的时间加长看갠 04/04 19:19