作者giuseppe (Giuseppe)
看板Biotech
標題Re: [問題]無法完全螯合His tag column 鎳離子
時間Thu Mar 29 15:12:21 2007
※ 引述《giuseppe (Giuseppe)》之銘言：
: 我在做完整個蛋白質純化後，最後以strip buffer (200mM EDTA)流洗
: 剛開始第一次使用column時可完全去除resin上之藍色鎳離子使最後resin上
: 呈現純白色。
: 但第二次使用後發現strip buffer無法完全去除藍色，
: 感覺還有些微鎳離子還結合在上面。
: 我有試過用3M NaOH 流洗 好像有少一點(不知道是心理作用還是真的)
: 不過還是無法像一開始用那樣呈現純白。
: 我charge buffer 的鎳離子是以NiSO4 配製的不知道有沒有差。
: 有誰跟我一樣情況或有任何解決方法的嗎?
sorry 寫錯 是0.5 M NaOH
NiSO4 為400mM
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◆ From: 140.121.155.191
1F：→ a64toto:只要把EDTA濃度提高到1M或2M,保證純白! 03/29 19:49
2F：→ giuseppe:感謝大家 03/30 14:00