作者giuseppe (Giuseppe)
看板Biotech
标题Re: [问题]无法完全螯合His tag column 镍离子
时间Thu Mar 29 15:12:21 2007
※ 引述《giuseppe (Giuseppe)》之铭言：
: 我在做完整个蛋白质纯化後，最後以strip buffer (200mM EDTA)流洗
: 刚开始第一次使用column时可完全去除resin上之蓝色镍离子使最後resin上
: 呈现纯白色。
: 但第二次使用後发现strip buffer无法完全去除蓝色，
: 感觉还有些微镍离子还结合在上面。
: 我有试过用3M NaOH 流洗 好像有少一点(不知道是心理作用还是真的)
: 不过还是无法像一开始用那样呈现纯白。
: 我charge buffer 的镍离子是以NiSO4 配制的不知道有没有差。
: 有谁跟我一样情况或有任何解决方法的吗?
sorry 写错 是0.5 M NaOH
NiSO4 为400mM
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.155.191
1F：→ a64toto:只要把EDTA浓度提高到1M或2M,保证纯白! 03/29 19:49
2F：→ giuseppe:感谢大家 03/30 14:00