作者tornwing (把賤格的份好好活下去..)
看板Biotech
標題[問題] 關於primer-dimer
時間Tue May 9 01:04:24 2006
就是RT-PCR的產物去跑電泳阿
有時會發現最底下會有primer-dimer的存在
當dimer較亮時
會發現你所要看的表現的band會暗許多
情況不一定
有時重P會改善..但有時反而更慘
要怎樣才能避免dimer的出現
或是說根本沒差不用管他
是因為primer太多..所以自己聚合還是
根本沒夾到你的cDNA或是夾不到
我一樣是跑35個cycle
但是那些cycle所需時間與taq等藥品都是照protocol做的
我也不是很懂
拜託諸位強者了
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老闆我想畢業阿orz
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.136.154
1F：推 ssuny:提高annealing的溫度?! 05/09 01:06
2F：推 blence:題外話,當大家都說primer dimer,可是有人真的用PAGE分出一 05/09 01:08
3F：→ blence:團的size是primer dimer,還是根本就是primer pool？ 05/09 01:09
4F：推 tornwing:感謝你 05/09 01:27
5F：推 enisx:或是primer濃度調低 使剩下沒用到的primer少一點 05/09 13:41
6F：推 oxoox:以上都沒有用 設計primer時就要注意避免戶黏 只能換掉一股囉 05/09 23:18
7F：→ oxoox:先檢查一下primer的序列會不會戶黏吧 05/09 23:20