作者tornwing (把贱格的份好好活下去..)
看板Biotech
标题[问题] 关於primer-dimer
时间Tue May 9 01:04:24 2006
就是RT-PCR的产物去跑电泳阿
有时会发现最底下会有primer-dimer的存在
当dimer较亮时
会发现你所要看的表现的band会暗许多
情况不一定
有时重P会改善..但有时反而更惨
要怎样才能避免dimer的出现
或是说根本没差不用管他
是因为primer太多..所以自己聚合还是
根本没夹到你的cDNA或是夹不到
我一样是跑35个cycle
但是那些cycle所需时间与taq等药品都是照protocol做的
我也不是很懂
拜托诸位强者了
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老板我想毕业阿orz
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.136.154
1F：推 ssuny:提高annealing的温度?! 05/09 01:06
2F：推 blence:题外话,当大家都说primer dimer,可是有人真的用PAGE分出一 05/09 01:08
3F：→ blence:团的size是primer dimer,还是根本就是primer pool？ 05/09 01:09
4F：推 tornwing:感谢你 05/09 01:27
5F：推 enisx:或是primer浓度调低 使剩下没用到的primer少一点 05/09 13:41
6F：推 oxoox:以上都没有用 设计primer时就要注意避免户黏 只能换掉一股罗 05/09 23:18
7F：→ oxoox:先检查一下primer的序列会不会户黏吧 05/09 23:20