ꄠ 先謝謝這位大大的回答 뀠引述《tsubasawolfy (批踢踢)》之銘言： : ※ 引述《smallhii (期月考)》之銘言： : : 請問一下各位前輩괳 : : 若是在進行對E-coli的transformation : : 但是長出來的E-coli只數十顆(不到30顆) : : 轉殖成功的又只佔不到10顆 orz : : 跟同學的相比 每一個人都幾乎上百顆起跳 : : 請問會是我在處理competent cell上時出現問題嗎 : competent cell處理時　盡量保持在冰上作業 也盡量保持靜置 加入plasmid後也別拿起來搖　小心的用pipette慢慢吸上吸下2~3下就好 : heatshock時間照老師給的講義做(有做過４５秒也有做過９０秒) : heatshoc完盡速插回冰上 不過要輕輕的= = : 以上都有做到 我們是做45秒鐘 HEATSHOCK完後 放回冰上2分鐘 : 還是plasmid啊 實在想不出什麼原因 : plasmid如果是老師給的應該不太可能有問題 : : 試劑劑量上都沒有問題 塗盤時也確保都有塗乾 : 玻棒用酒精燈消毒後　可先壓plate上過一陣子冷卻後再塗盤 玻棒有用酒精消毒過 再用酒精燈燒 燒完後有冷卻幾秒鐘 才進行塗盤 難道是冷卻時間不夠嗎?? 可是跟同學差不多時間啊 之前做的實驗也都有長成功 : 避免小菌菌被燙死 : : 還會有其它原因嗎 麻煩板上的高手解答 : 塗盤前看有沒有離心增加菌的濃度 不過通常是不需괊: : 小的是新手 謝謝 : 這是我實驗課的心得m(__ __)m 別鞭太大力 實在是想不出原因了 還是麻煩大家告訴小的了 --

※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.164.112.175 ※ 編輯: smallhii 來自: 218.164.112.175 (04/11 22:15)