ꄠ 先谢谢这位大大的回答 뀠引述《tsubasawolfy (批踢踢)》之铭言： : ※ 引述《smallhii (期月考)》之铭言： : : 请问一下各位前辈괳 : : 若是在进行对E-coli的transformation : : 但是长出来的E-coli只数十颗(不到30颗) : : 转殖成功的又只占不到10颗 orz : : 跟同学的相比 每一个人都几乎上百颗起跳 : : 请问会是我在处理competent cell上时出现问题吗 : competent cell处理时　尽量保持在冰上作业 也尽量保持静置 加入plasmid後也别拿起来摇　小心的用pipette慢慢吸上吸下2~3下就好 : heatshock时间照老师给的讲义做(有做过４５秒也有做过９０秒) : heatshoc完尽速插回冰上 不过要轻轻的= = : 以上都有做到 我们是做45秒钟 HEATSHOCK完後 放回冰上2分钟 : 还是plasmid啊 实在想不出什麽原因 : plasmid如果是老师给的应该不太可能有问题 : : 试剂剂量上都没有问题 涂盘时也确保都有涂乾 : 玻棒用酒精灯消毒後　可先压plate上过一阵子冷却後再涂盘 玻棒有用酒精消毒过 再用酒精灯烧 烧完後有冷却几秒钟 才进行涂盘 难道是冷却时间不够吗?? 可是跟同学差不多时间啊 之前做的实验也都有长成功 : 避免小菌菌被烫死 : : 还会有其它原因吗 麻烦板上的高手解答 : 涂盘前看有没有离心增加菌的浓度 不过通常是不需괊: : 小的是新手 谢谢 : 这是我实验课的心得m(__ __)m 别鞭太大力 实在是想不出原因了 还是麻烦大家告诉小的了 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 218.164.112.175 ※ 编辑: smallhii 来自: 218.164.112.175 (04/11 22:15)