作者ROKEE (可不可以不要再胖下去啦~)
看板Biotech
標題Re: [問題]GST fusion protein效率不佳
時間Wed Mar 29 20:29:30 2006
※ 引述《zerpher (張開雙手變成翅膀守護妳)》之銘言:
: protein 的大小大概83kd左右
: vector是PGEX 6P-1
: 在DE3中表達
: 現在的問題是protein表達的效率太差
: 即使以KIT純化也純化不出足夠的protein
: 有人有以GST系統表達較大分子量的經驗嗎?
: 此外同一個蛋白質也試過以lipofectamine transfection至BHK-21 cell
: 是以EGFP-N2做載體
: 也一樣有效率太差的問題
: 是否有什麼解決的方法?
小弟也有個疑惑
pGEX系統不是tac promoter嗎?
那為什麼還要送帶有DE3的BL21呢?
可不可以用BL21或JM109然後IPTG誘導就好?
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最近嘗試摸索中,懇請賜教:DDD
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